Pollen Viability Test Kit (TTC)

花粉活力檢測(cè)試劑盒（TTC法）

產(chǎn)品信息

應(yīng)用背景

花粉活力的大小直接影響授粉、受精過(guò)程，與植物的產(chǎn)量密切相關(guān)，通過(guò)花粉活力的測(cè)定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形態(tài)、生理特征，花粉活力的檢測(cè)方法常用的有：花粉萌發(fā)測(cè)定法、碘-碘化jia（I2-KI）染色法、TTC染色法、過(guò)氧化物酶檢測(cè)，MTT、FDA等方法。

產(chǎn)品描述

TTC，英文名2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride，中文名2,3,5-三苯基氯化四氮唑，又稱為紅四氮唑，是一種氧化還原指示劑，具有標(biāo)準(zhǔn)的氧化還原電位（80 mV）。溶于水形成無(wú)色溶液，還原后生成不溶于水的三苯基甲臜。此物質(zhì)比較穩(wěn)定，不易被氧化，因此，TTC廣泛用于酶試驗(yàn)中測(cè)定花粉活力。

本花粉活力檢測(cè)試劑盒（Pollen Viability Test Kit）就是基于TTC的特性，用作酶試驗(yàn)的氫受體，TTC還原量反映脫氫酶活性，從而判斷花粉的活力。活力強(qiáng)的花粉染色后呈紅色，弱活力的花粉染色后呈淡紅色，無(wú)活力或不育的花粉呈無(wú)色。

試劑盒組成

注意事項(xiàng)

1） 本品開(kāi)蓋后請(qǐng)盡快使用，否則效率會(huì)下降。如果溶液變成紅色，需棄用。

2） TTC染色液對(duì)人體有輕微刺激性，請(qǐng)注意小心防護(hù)；

3） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃避光保存，6個(gè)月有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

操作方法【詳見(jiàn)懋康網(wǎng)站整理】

2.1取適量的TTC染色液恢復(fù)至室溫，混合均勻待用。

2.2取成熟將要開(kāi)放的新鮮花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.3將花粉物質(zhì)置于載玻片上，滴加1-2滴TTC染色液，蓋上蓋玻片。

【注】：染色時(shí)需將花粉完quan浸沒(méi)于染色液中；

2.4恒溫箱放置，低倍顯微鏡觀察著色情況，每片取5個(gè)視野。

【注】：染色溫度一般以25-35℃為宜。染色時(shí)間一般以30min-60min，具體根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。

三、染色結(jié)果觀察：

活力強(qiáng)——紅色；

活力弱——淡紅色；

無(wú)活力或不育——無(wú)色。

計(jì)算：觀察并統(tǒng)計(jì)100?；ǚ?，計(jì)算有活力花粉的百分?jǐn)?shù)，其公式為：

花粉活力百分?jǐn)?shù)（%）=有活力花粉數(shù)/100 ×100%

染色示例（來(lái)自文獻(xiàn)，僅做參考）

文獻(xiàn)來(lái)源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

試驗(yàn)對(duì)象：鳳丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

試驗(yàn)?zāi)康?/strong>：比較九種不同的花粉活力檢測(cè)方法，包括：MTT、醋酸洋紅、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 過(guò)氧化物酶、亞甲基藍(lán)、FDA等，來(lái)鑒別有活力和無(wú)活力花粉。

試驗(yàn)結(jié)果：

FigComparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

試驗(yàn)結(jié)論：本課題中發(fā)現(xiàn)MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效區(qū)分有活力和無(wú)活力花粉，其中，F(xiàn)DA染色結(jié)果與花粉萌發(fā)結(jié)果類似。

文獻(xiàn)來(lái)源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

試驗(yàn)對(duì)象：紅薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

試驗(yàn)?zāi)康模夯ǚ刍盍y(cè)定

試驗(yàn)圖片：

FigComparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar =?200 μm. (b) TTC, bar =?200 μm. (c) Magenta acetate, bar =?200 μm. (d) FDA, bar =?200 μm. (e, f) In situ germination, bar?=?500 μm. (g) In vitro germination, bar =?100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P?<?0.001), and error bars represent standard deviations

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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